聚丙烯酰胺凝胶电泳的用途
聚丙烯酰胺凝胶电泳的用途: 在制胶前应准备玻璃板、垂直平板支架的安装、密封好得玻璃板。
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首先用洗涤剂将玻璃板反复清洗干净,待玻璃板晾干后,再将1mm塑料薄片沾少许清水,然后使其贴在玻璃板上,然后将另一块凹行玻璃板与原玻璃板紧贴在一起。
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再把贴好的玻璃板,然后放入垂直支架内侧,两侧用钢夹固定好,钢夹的高度不能超过凹行玻璃的凹口处为准,两侧选用力度对称、大小适中的钢夹。
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将1%的琼脂糖加热融化后,倒入支架板底槽中,然后将其密封起来,再使用容器吸取少量琼脂溶液,加入到玻璃板两边的缝隙内侧,将其密封,冷却凝固后作为备用。 用30%的
丙烯酰胺溶液10ml;10xTBE溶液4ml;双蒸水16ml;20%的过硫酸铵(AP)200ul;TEMED溶液20ul配制PAGE凝胶。 把垂直支架倾斜30°,将配好的名为PAGE的凝胶溶液沿凹形玻璃平口处缓缓倒入至距平口7mm处为准,灌胶完成后,用枪吸取少量水密封胶口,压平胶面即可,后续可以开始点样电泳。
用微量移液器吸取1ul的溴酚蓝溶液,根据PCR产物量大小吸取适量样品,点入胶孔内即可。点样结束后,即可接通电源,调节电压至300V,90min,电泳时间根据PCR产物分子量可适当延长。